1.簡介

谷物和豆類是人類和動物飲食的主要組成部分。半乳糖基蔗糖（棉籽糖、水蘇糖和毛蕊草糖）是許多谷物和豆類的主要成分，谷物豆類的抗?fàn)I養(yǎng)性通常與這類低聚糖的存在有關(guān)。半乳糖基蔗糖在上上部消化道不被水解，而在小腸下端，在細(xì)菌作用下被代謝，產(chǎn)生甲烷、氫和二氧化碳，易導(dǎo)致腸胃脹氣和腹瀉。因此，半乳糖基蔗糖是單胃動物飲食的抑制因子。

從豆類粉中提取半乳糖基蔗糖可以使用集中溶劑，通常為水和酒精的混合物。在提取前將內(nèi)源性α-半乳糖苷酶和轉(zhuǎn)化酶滅活非常重要。

使用色譜法可以分離并定量檢測提取的半乳糖基蔗糖，但是這些方法通常為半定量方法。高效液相色譜法和低壓液相色譜法可以定量，但是消耗時間長，尤其是樣品提取方面。

棉籽糖、水蘇糖和毛蕊草糖可以被α-半乳糖苷酶水解為D-半乳糖和果糖。目前，市場上已經(jīng)有檢測棉籽糖的生化試劑盒。這些試劑盒中采用了從綠咖啡豆中提取的α-半乳糖苷酶，能夠快速水解棉籽糖，但是對水蘇糖和毛蕊草糖的作用非常緩慢，而且在定的孵育條件下不能*水解低聚糖。而Megazyme試劑盒采用來自黑曲霉的酶，能夠*并快速的催化棉籽糖、水蘇糖和毛蕊草糖水解為D-葡萄糖和蔗糖。

2.檢測原理

在α-半乳糖苷酶和轉(zhuǎn)化酶的作用下，半乳糖基蔗糖水解為D-葡萄糖、D-半乳糖和D-果糖。然后使用葡萄糖氧化酶/過氧化物酶試劑測定D-葡萄糖。該方法無法區(qū)分棉籽糖、水蘇糖和毛蕊草糖，但是可以作為一個整體檢測。1摩爾棉籽糖含有1摩爾D-葡萄糖，濃度以摩爾表示。同時測定樣品提取物中的游離蔗糖和D-葡萄糖。